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支原體清除試劑1(1000x)說(shuō)明書(shū)

 更新時(shí)間:2023-04-18 點(diǎn)擊量:678

支原體清除試劑1(1000x)說(shuō)明書(shū)

上海起發(fā)生物科技有限公司(Shanghai BioHub Biotechnology Co., Ltd.)屬于上海起發(fā)實(shí)驗(yàn)試劑有限公司(2009年成立)旗下的子公司,成立的初衷是建立上海起發(fā)生物自有品牌,打造優(yōu)質(zhì)的生物試劑民族自有品牌。降低成本的同時(shí),把好生物產(chǎn)業(yè)鏈中的國(guó)產(chǎn)生物試劑品質(zhì)關(guān)。未來(lái)讓每一個(gè)和我們一樣擁有民族情懷的企業(yè),共同創(chuàng)世界優(yōu)秀的中國(guó)生物制造企業(yè),圓夢(mèng)中國(guó)。

產(chǎn)品詳情

貨號(hào)

規(guī)格

價(jià)格

78EH10008-1ml

1ml

¥1160.00

產(chǎn)品描述

本公司開(kāi)發(fā)的支原體清除試劑1含有抑制支原體蛋白質(zhì)合成的藥物,而支原體清除試劑2含有抑制支原體DNA合成的藥物。由于兩種試劑的作用機(jī)理不同,支原體清除試劑1需要處理不少于15天,而支原體清除試劑2只需處理7天。兩者都可以達(dá)到殺滅和清除支原體的目的。

 

使用方法

使用方法

(一)支原體清除試劑 1

1. 使用之前,先將支原體清除試劑1用 PBS或者無(wú)血清培養(yǎng)液稀釋10倍后,放 4℃冰箱保存。

2. 將 50-100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞鋪到 60mm的細(xì)胞培養(yǎng)皿內(nèi),加入4mL含支原體清除試劑1的正常細(xì)胞培養(yǎng)液(使用稀釋 10倍后的支原體清除試劑 1,按 1:100 比例加入)。

3. 每 2-3天更換細(xì)胞培養(yǎng)液。換液時(shí),用 PBS沖洗 2-3 遍細(xì)胞,以將死亡的支原體清洗干凈。而后加入新鮮的含支原體清除試劑 1 的正常細(xì)胞培養(yǎng)液。期間如果細(xì)胞密度過(guò)大,請(qǐng)保持細(xì)胞密度適當(dāng)(貼壁細(xì)胞可能需要胰酶消化),并更換新的培養(yǎng)皿。

4. 處理15天后,可以用支原體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè),檢測(cè)支原體是否殺滅。如果仍有支原體殘留,可以考慮再處理6天。

5. 以后每隔1個(gè)月進(jìn)行支原體的常規(guī)檢測(cè),以保證沒(méi)有新的支原體污染。

實(shí)驗(yàn)案例分析

 image.png

如上圖所示,左側(cè)為未經(jīng)支原體清除試劑處理的人Hela細(xì)胞,經(jīng)DAPI染色后,除了細(xì)胞核為藍(lán)色外,細(xì)胞質(zhì)也有大量的絮狀核酸物質(zhì)被染成藍(lán)色,這些處于細(xì)胞質(zhì)的核酸物質(zhì)就是支原體 DNA。而右側(cè)為經(jīng)過(guò)本公司的支原體清除試劑2處理7天的 Hela細(xì)胞,經(jīng)DAPI染色后,除了細(xì)胞核為藍(lán)色外,細(xì)胞質(zhì)沒(méi)有任何絮狀核酸物質(zhì)被染成藍(lán)色,說(shuō)明支原體已經(jīng)被清除。

注意事項(xiàng)

建議將細(xì)胞分成三份:第一份添加清除試劑1,第二份添加清除試劑2,第三份同時(shí)添加清除試劑1和清除試劑2進(jìn)行殺滅(注:同時(shí)添加兩種藥物可能對(duì)細(xì)胞的毒性較大,但是殺滅的概率會(huì)非常高), 這樣支原體對(duì)兩種藥物同時(shí)產(chǎn)生抗性和處理過(guò)程中細(xì)胞同時(shí)死亡的概率會(huì)非常低。如果同時(shí)添加清除試劑 1 和清除試劑 2,細(xì)胞可以每 2 天更換一次培養(yǎng)液。

處理過(guò)程中,注意每天觀察細(xì)胞的狀況,如果發(fā)現(xiàn)支原體清除試劑對(duì)細(xì)胞的毒性較大,可以加大培養(yǎng)液中的血清濃度或者提高細(xì)胞的密度。

清除試劑1和清除試劑2在降低濃度后使用稀釋10倍后的支原體清除試劑1或者 2,再按 1:500 比例加入,即藥物的最終稀釋比例為 1:5000)也可以加入到培養(yǎng)液中作為短期(1-2個(gè)月)的支原體污染預(yù)防藥物,但是不建議在細(xì)胞培養(yǎng)液中長(zhǎng)期(超過(guò)2個(gè)月)加入,因?yàn)橛锌赡軐?dǎo)致對(duì)該兩種藥物有抗性的支原體出現(xiàn)。

運(yùn)輸及保存方法


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