kerafast EH1025-PM說明書
Pseudotyped ΔG-luciferase (G*ΔG-luciferase) rVSV
假型ΔG-熒光素酶（G*ΔG-熒光素酶）rVSV
ΔG-熒光素酶是一種復制受限的重組水皰性口炎病毒 (rVSV)，可用于生產(chǎn)含有來自多種異源病毒（包括需要 BSL-3 或 BSL-4 生物防護的病毒）包膜糖蛋白的假型病毒；然而，由于 rVSV-ΔG 假型的傳染性僅限于單輪復制，因此可以使用 BSL-2 遏制措施來處理假型。這些特性與 rVSV-ΔG 假型的快速復制動力學一起，已被證明在旨在鑒定多種病毒的細胞受體的研究中很有用，并且它們還提供了一個強大的平臺來篩選進入抑制劑的文庫并評估隨后的中和抗體反應。疫苗接種[1]。
訂購該試劑時，將發(fā)送一瓶 VSV-G 假型 ΔG-熒光素酶 (G*ΔG-熒光素酶)，按照 [1] 中所述的程序，可直接使用該酶生成含有您選擇的包膜蛋白的假型。用 G*ΔG-熒光素酶感染細胞會在感染后 2-3 小時內(nèi)產(chǎn)生可檢測的熒光素酶活性，并在感染后的接下來 4-8 小時內(nèi)迅速增加。對于每個使用的細胞系，感染性需要針對熒光素酶活性進行標準化。絕對傳染性可以通過間接免疫熒光顯微鏡或流式細胞術(shù)使用 VSV 基質(zhì) (M) 蛋白、VSV 核衣殼 (N) 蛋白或熒光素酶的抗體進行量化。由于 G*ΔG-熒光素酶經(jīng)歷單輪感染，每個 M、N 或熒光素酶陽性細胞代表一個病毒感染單位。
研究員有責任尋求機構(gòu)生物安全安全委員會批準在其實驗室空間內(nèi)使用重組 DNA、轉(zhuǎn)基因動物或傳染性病原體，并在使用這些材料期間保持機構(gòu)生物安全安全委員會的批準。
來自Michael A. Whitt 博士的實驗室。，田納西大學。
| 產(chǎn)品類別： | 病毒 |
| 生物安全等級： | BSL-2 |
| 載體信息： | G*ΔG-熒光素酶使用 [1] 中所述的 VSV 反向遺傳學系統(tǒng)從質(zhì)粒 pVSV-δG-熒光素酶、pBS-N-ΦT、pBS-P-ΦT、pBS-G-ΦT 和 pBS-L-回收ΦT。恢復后，在用 pCAGGS-G 轉(zhuǎn)染的 BHK-21 細胞上擴增斑塊分離物（斑塊可以在瞬時表達 VSV-G 的細胞上獲得）。通過感染用 pCAGGS-G 以低復數(shù) (MOI = 0.1) 轉(zhuǎn)染的 BHK-21 細胞并在 BHK-21 細胞上滴定，產(chǎn)生二級工作原液。 |
| 病毒： | VSV-G 假型 ΔG-熒光素酶 (G*ΔG-熒光素酶) |
| 滴度： | ≥ 6x10e8 IU/mL |
| 血清型： | 印第安納州/圣胡安 |
| 接種條件： | 為了產(chǎn)生具有異源包膜糖蛋白的假型，細胞（BHK-21 或 HEK-293）首先用表達所選糖蛋白的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染，約 24 小時后用 G*ΔG-熒光素酶以約 3 的復數(shù)（MOI）感染到 5. 為了產(chǎn)生 G*ΔG-熒光素酶的工作儲備，已用 pCAGGS-G 轉(zhuǎn)染的細胞用低多重性 (MOI = 0.1) 的 G*ΔG-熒光素酶感染，并在大約 18-24 小時后收獲培養(yǎng)物上清液。感染。 |
| 貯存： | 儲存在-80℃。不推薦多次冷凍/解凍。 |
| 發(fā)貨： | 在干冰上冷凍 |
