eaglebio KTR-757說明書

MMAE ADC ELISA Kit

 貨號：KTR-757

 MMAE抗體藥物偶聯物（ADC）ELISA分析試劑盒（酶聯免疫分析試劑盒）旨在用于定量測定測試樣品中抗體-MMAE-偶聯物的水平。對于MMAE抗體藥物偶聯物（ADC）的臨床前和臨床藥理學研究非常有用。該試劑盒可直接使用來自組織/細胞培養(yǎng)物的樣品以及來自人，大鼠，小鼠，靈長類動物等的血清樣品。基于該試劑盒的基于人源化單克隆抗體的MMAE-ADC和基于小鼠單克隆抗體的MMAE-ADC均可進行測量。

MMAE ADC ELISA試劑盒

在美國開發(fā)和生產的MMAE ADC ELISA試劑盒

尺寸：1×96個孔的
靈敏度：0.0435μg/ mL的
動態(tài)范圍：0.032 - 4.0微克/毫升
孵育時間：2.5小時
樣品類型：血清，細胞培養(yǎng)，組織
樣本大小：100μL
備用名稱：單甲基auristatin E，MMAE抗體藥物共軛ELISA試劑盒
僅供研究使用

包含的控件

測定原理

MMAE ADC ELISA試劑盒的設計，開發(fā)和生產，用于定量測量血清中的單甲基澳瑞他汀E（MMAE）共軛物。該測定法利用競爭性免疫測定技術和僅與單甲基澳瑞他汀E結合的抗體結合使用。

將測定校準物（抗體MMAE共軛物）和測試血清樣品直接添加到微滴定板的孔中，該板已涂有特異性抗MMAE抗體。隨后，將辣根過氧化物酶（HRP）共軛的MMAE添加到每個孔中。在溫育期間，抗體MMAE綴合物與HRP綴合的MMAE競爭抗MMAE抗體的有限結合位點。形成了包被良好的“抗MMAE抗體-HRP綴合的MMAE”的免疫復合物。未結合的抗體和緩沖液基質在隨后的洗滌步驟中被去除。為了檢測該免疫復合物，將孔與底物溶液在定時反應中孵育，然后將其與酸性試劑（即ELISA終止溶液）終止反應。然后在分光光度計酶標儀中測量吸光度。結合到每個微量滴定孔壁上的免疫復合物的酶促活性與測試樣品中抗體-MMAE偶聯物的量成反比。通過在4參數或log-logit曲線擬合上繪制每個校準器的吸光度與各自的抗體-MMAE綴合物濃度的關系來生成校準曲線。直接從該校準曲線確定測試樣品中抗體-MMAE綴合物的濃度。

檢驗程序

1. 將足夠數量的Anti-MMAE抗體包被的微孔板/孔放在支架中，以一式兩份運行人類Anti-MMAE標準品，對照和未知樣品。
2. 將100 µL校準物和測試樣品添加到微孔中。
3. 牢固密封板孔，蓋上箔紙或其他材料以防光照，然后在ELISA板振動器（小軌道半徑）上以400至450 rpm的轉速旋轉30分鐘。
4. 立即向每個孔中加入25 µL HRP共軛MMAE（目錄號30719）。（注意：添加HRP共軛MMAE之前無洗滌步驟）
5. 牢固密封板孔，蓋上箔紙或其他材料以避光，然后在ELISA板振蕩器（小軌道半徑）上旋轉2小時。在400至450 rpm下±10分鐘。
6. 通過將350 µL工作洗滌溶液分配到每個孔中，然后將所有內容物*吸出，將每個孔洗滌5次。
7. 或者，可以使用自動微孔板清洗機。
8. 在每個孔中加入100 µL ELISA HRP底物。
9. 用鋁箔或其他材料覆蓋板，以避免暴露在光線下。在室溫下靜置板靜置20分鐘。
10. 立即將100 µL ELISA終止溶液添加到每個孔中。輕輕混合。
11. 讀取450 nm處的吸光度。

典型標準曲線

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