laebio K007說(shuō)明書(shū)

Sumoylation Control Kits 
Catalog # K007 supplied with proteins

描述：
該檢測(cè)試劑盒含有用于常規(guī)檢測(cè)SUMO化活性的試劑。包括Sumoylation標(biāo)記（人拓?fù)洚悩?gòu)酶I蛋白）以允許清楚地檢測(cè)反應(yīng)。已經(jīng)證明該測(cè)定法適用于粗提物。強(qiáng)烈建議將人類(lèi)EI，活性物質(zhì)（Cat＃P001; P006），人類(lèi)E II，活性物質(zhì)（Cat＃P002; P011）和人類(lèi)SUMO I，活性物質(zhì)（Cat＃P003; P012）與此試劑盒一起使用。

K007套件包含：

• SAE I和SAE II（人類(lèi)EI）（Cat＃P006）
• UBC9（人類(lèi)E II）（Cat＃P011）
• SUMO I（活動(dòng)形式）。（Cat＃P012）
• 人DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I片段。（Cat＃B007）
• 抗拓?fù)洚悩?gòu)酶I抗體。（Cat＃AP006）（凍干的抗體應(yīng)在使用前用100ul H ₂ O 重構(gòu)。）
• 10X的SUMO化反應(yīng)緩沖液。（Cat＃B006）（10x緩沖液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl ₂和20mM ATP。）

上述試劑適用于50次SUMO化反應(yīng)。

測(cè)定條件：
SUMO化測(cè)定在20微升的終體積中含有20mM的Hepes pH為7.5，5mM的氯化鎂反應(yīng)緩沖液中進(jìn)行₂，2mM的ATP。我們建議添加新鮮的2mM ATP以確保提供足夠的能量。

拓?fù)洚悩?gòu)酶I Sumoylation Control Protocol：

1. 加入2ul 50kd拓?fù)洚悩?gòu)酶I片段（Cat＃B007）作為每個(gè)反應(yīng)的底物。
2. 在每個(gè)反應(yīng)中，首先向底物中加入2ul E2，然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反應(yīng)緩沖液（Cat＃B006），2ul E1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使總體積達(dá)到20μl 。
3. LAE SUMO化蛋白的宜反應(yīng)濃度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml
         為對(duì)照測(cè)定的推薦條件是37 ^ø 30?60分鐘c。。
    
4. 在10 ml（Cat＃AP006）中使用1000倍稀釋的提供的拓?fù)洚悩?gòu)酶I抗體進(jìn)行免疫印跡。應(yīng)檢測(cè)四個(gè)主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗體（cat＃AP006）的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白（cat＃B007）的Western印跡（12.5％凝膠）。泳道1：sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2：未經(jīng)過(guò)酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗體（ Cat＃AP006）可檢測(cè)至少四個(gè)主要的SUMO化Topo-1片段 。

Sumoylation Protocol：

1. 準(zhǔn)備合適的純化底物蛋白。
2. 在每個(gè)反應(yīng)中，首先向底物中加入2μlE2，然后加入2μlSy,2μl10μl反應(yīng)緩沖液，2μlE1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使終體積達(dá)到20μl。
3. LAE蛋白的宜反應(yīng)濃度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml

運(yùn)輸/儲(chǔ)存：
此套件隨附干冰，應(yīng)儲(chǔ)存在-70 ^o C或更低溫度。  

法律考慮：僅供研究使用。

laebio中國(guó)代理,laebio上海代理，laebio北京代理，laebio廣東代理，laebio江蘇代理laebio湖北代理,laebio天津代理,laebio黑龍江代理,laebio湖南代理laebio內(nèi)蒙古代理,laebio吉林代理,laebio福建代理,laebio江蘇代理,laebio浙江代理,laebio四川代理,laebio代理，

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Catalog # K007 supplied with proteins

描述：
該檢測(cè)試劑盒含有用于常規(guī)檢測(cè)SUMO化活性的試劑。包括Sumoylation標(biāo)記（人拓?fù)洚悩?gòu)酶I蛋白）以允許清楚地檢測(cè)反應(yīng)。已經(jīng)證明該測(cè)定法適用于粗提物。強(qiáng)烈建議將人類(lèi)EI，活性物質(zhì)（Cat＃P001; P006），人類(lèi)E II，活性物質(zhì)（Cat＃P002; P011）和人類(lèi)SUMO I，活性物質(zhì)（Cat＃P003; P012）與此試劑盒一起使用。

K007套件包含：

• SAE I和SAE II（人類(lèi)EI）（Cat＃P006）
• UBC9（人類(lèi)E II）（Cat＃P011）
• SUMO I（活動(dòng)形式）。（Cat＃P012）
• 人DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I片段。（Cat＃B007）
• 抗拓?fù)洚悩?gòu)酶I抗體。（Cat＃AP006）（凍干的抗體應(yīng)在使用前用100ul H ₂ O 重構(gòu)。）
• 10X的SUMO化反應(yīng)緩沖液。（Cat＃B006）（10x緩沖液含有200mM Hepes pH 7.5,50mM MgCl ₂和20mM ATP。）

上述試劑適用于50次SUMO化反應(yīng)。

測(cè)定條件：
SUMO化測(cè)定在20微升的終體積中含有20mM的Hepes pH為7.5，5mM的氯化鎂反應(yīng)緩沖液中進(jìn)行₂，2mM的ATP。我們建議添加新鮮的2mM ATP以確保提供足夠的能量。

拓?fù)洚悩?gòu)酶I Sumoylation Control Protocol：

1. 加入2ul 50kd拓?fù)洚悩?gòu)酶I片段（Cat＃B007）作為每個(gè)反應(yīng)的底物。
2. 在每個(gè)反應(yīng)中，首先向底物中加入2ul E2，然后加入2ul Sumo-1,2ul 10x反應(yīng)緩沖液（Cat＃B006），2ul E1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使總體積達(dá)到20μl 。
3. LAE SUMO化蛋白的宜反應(yīng)濃度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml
         為對(duì)照測(cè)定的推薦條件是37 ^ø 30?60分鐘c。。
    
4. 在10 ml（Cat＃AP006）中使用1000倍稀釋的提供的拓?fù)洚悩?gòu)酶I抗體進(jìn)行免疫印跡。應(yīng)檢測(cè)四個(gè)主要的sumoylated波段。

使用Topo-1抗體（cat＃AP006）的SUMO化 50Kd Topo-1蛋白（cat＃B007）的Western印跡（12.5％凝膠）。泳道1：sumoylated 50Kd Topo-I片段; 泳道2：未經(jīng)過(guò)酰化的50Kd Topo-I片段。

Topo-1抗體（ Cat＃AP006）可檢測(cè)至少四個(gè)主要的SUMO化Topo-1片段 。

Sumoylation Protocol：

1. 準(zhǔn)備合適的純化底物蛋白。
2. 在每個(gè)反應(yīng)中，首先向底物中加入2μlE2，然后加入2μlSy,2μl10μl反應(yīng)緩沖液，2μlE1和2μl20mMATP。后，加入H ₂ O使終體積達(dá)到20μl。
3. LAE蛋白的宜反應(yīng)濃度如下：
   • EI：7.5ug / ml
   • E II：50ug / ml
   • SUMO-1：50ug / ml

運(yùn)輸/儲(chǔ)存：
此套件隨附干冰，應(yīng)儲(chǔ)存在-70 ^o C或更低溫度。  

法律考慮：僅供研究使用。